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胎牛血清运用中遇到的常见问题

胎牛血清运用中遇到的常见问题

发布时间:2020-12-23

1、怎样贮存和冻结血清才不会使产质量量受损?

将血清从冷冻箱取出后,先置于 2℃ 冰箱使之融解,然后在室温下使之全融。但必须留意的是,融解过程中必须规矩地摇晃均匀。长时间贮存在 2℃ 时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)或许集合而形成沉积或可见的混浊。因而,推荐在 -20 ℃ 以下贮存血清,并防止反复冻融。

我司主张血清应保存在 -20 ℃。若存放于 ℃ 时,请勿超越一个月。若一次无法用完一瓶,主张无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。

2、怎样防止血清中发生沉积?

按如下操作可防止沉积的发生:

(1) 冻结血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉积的发生。

(2) 血清分装冻存时,须规矩摇晃均匀 (当心勿形成气泡),使温度与成分均一。

(3) 勿直接由 -20 ℃ 直接至 37 ℃ 冻结,因温度改变太大,简单形成蛋白质凝结而发生沉积。

(4) 勿将血清置于 37 ℃ 太久,否则血清会变得污浊,同时血清中许多较不稳定的成份也会因而受到破坏,然后影响血清的质量。

(5) 血清的热灭活十分简单形成沉积物的增多,若非必要,可以无须做此过程。

(6) 若必须做血清的热灭活,请遵守 56 ℃,30 分钟的准则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会形成沉积物的增多。

3、 血清中包括絮状沉积,它们是什么,怎样处理?

沉积包括纤维蛋白和脂蛋白。这是正常特性,不会影响产品性质。要除掉沉积,离心血清(400 g1分钟)或许简略的让其沉积在瓶子底部,将血清当心的转移到另一个无菌瓶里(一般不主张采用过滤的方法除掉沉积,因为沉积会堵塞滤膜而无法过滤)。大多情况悄悄摇摆沉积并加热至 37 ℃ 就会再溶解。所以,运用产品时要摇摆并加热血清至 37 ℃,沉积会自然消失。

4、小牛血清和胎牛血清有何区别与留意事项?

来历不同:胎牛血清(Fetal Bovine Serum ,FBS)是在屠宰怀孕母牛的时候, 通过心脏穿刺采血获取的胎牛的血清,新生牛(小牛)血清(Calf serum, CS)采自出生 10 至 14 天的小牛。

组份与份额不同:两者所含的促细胞成长因子、促贴附因子、激素及其他活性物质等组份与份额不同,用途与用法不同:某些细胞必需胎牛血清才能成长,而有些细胞只需小牛血清即可,运用浓度不同,一般在 5%10%,有特殊要求的浓度在20%


血清保存和运用须留意:血清应保存在 -5 ℃ 至 -20 ℃,若存放在 ℃ 不行超越一个月。冻结血清时 ,应先将血清至于 2℃ 冰箱,并经常摇匀使之溶解,然后至室温放置使之升温,不行将冷冻的血清直接放入 37 ℃ 水浴或许温箱中,如放在 37 ℃ 冻结,色彩加深,粘稠度也会添加,血清在冻结和热灭活后,应按用量分装并于 -20 ℃ 保存,防止反复冻融。



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