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细胞迁移分析的方法

细胞迁移分析的方法

发布时间:2020-05-20

细胞迁移分析的方法

细胞迁移是细胞在接收到迁移信号或感受到某些物质的浓度梯度后而产生的移动。在细胞迁移的过程中,细胞不断重复着向前方伸出突足,然后牵拉胞体的循环过程。

在肿瘤细胞行为分析中,细胞侵袭是肿瘤细胞转移的前奏,而转移则是肿瘤细胞侵袭的继续和结果。细胞迁移需要内外因素的配合外部的因素指的是细胞外的信号分子(包括趋化因子),内部因素则指细胞的信号传导系统和执行运动的细胞骨架和分子马达,还有参与粘着斑形成的各种分子。

目前传统的方法是通过包含有碳酸酯滤膜的侵袭腔室上下腔室内进行细胞行为分析如果只需要分析细胞的运动能力或者需要了解药物对细胞运动能力的影响,直接将滤膜放在侵袭腔室上下腔室,这也被作为传统的细胞迁移分析模型。

如果需要对细胞的浸润能力进行分析,则需要将细胞外基质组分铺在滤膜上,确保膜孔都被基质蛋白均匀覆盖,细胞不能自由穿过,必须分泌水解酶,并通过变形运动才能穿过这种铺有基质蛋白的滤膜。对跨膜的细胞进行固定、染色和计数,从而获得细胞的侵袭能力。

细胞迁移分析与细胞侵袭分析的区别主要在于滤膜上是否包被了基质蛋白。然而传统的方法需要进行繁琐的试剂配制,以及实验流程优化,后繁琐的手动计数也会影响实验数据的有效性。

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